基因工程考试大纲

一、基本目标与要求

1. 理解基因的概念与基本特征，掌握基因工程实现的基本策略。

2. 理解和掌握基因工程实施过程涉及的工具、方法、和原理。

3. 理解和掌握基因工程实际操作中核酸分子的分离纯化和分析技术，掌握各种测序技术的基本原理及使用策略。

4. 理解不同类型文库构建的基本原理，掌握不同文库构建的方法与策略，及其在基因工程实施过程中的应用。

5. 理解多种基因组编辑技术的基本原理，掌握现代基因组工程技术的基本策略。

6. 了解并掌握基因工程在植物，动物，微生物领域的研究手段和应用现状。

二、试题模式及所占比例

考试总分150分，分概念题和叙述题两个方面，其中概念题占50％，叙述题占50％，概念题包括：选择题（约占20%）、填空题（约占30%）；叙述题包括：简答题（约占20%），问答题（约占30%）。

三、复习重点

基因工程实现过程中涉及的工具、方法、原理和策略；现代基因组研究技术的方法、原理以及在基因工程实现过程中的应用。

四、课程复习大纲

第1章 基因的基本概念

本章重点和难点：了解基因操作，基因工程的基本概念和定义。

1.1. 基因与基因结构

1.2. 基因操作与基因工程

第2章 工具酶

本章重点和难点：各种分子克隆工具酶的基本特性，作用方式和使用条件。在基因工程操作中对分子克隆工具酶的使用方法与选择策略。

2.1. 限制性内切酶

2.2. 修饰酶

2.3. DNA聚合酶

2.4. 其他工具酶

第3章 载体

本章重点和难点：克隆载体及表达载体等各种载体的基本特性，开发思路、和工作原理；以及在各种基因工程技术中对载体的选择策略与应用等。

3.1. 质粒载体

3.2. 噬菌体载体·

3.3. 人工染色体载体

3.4. 表达载体

3.5. 穿梭载体

3.6. 整合载体

第4章 核酸分子的分离、检测与分析技术

本章重点和难点：核酸分子的分离、检测的原理与方法，各种核酸分子互作技术的原理，以及在基因工程实施过程中的应用。

4.1. DNA与RNA的分离，检测和纯化

4.2. DNA, RNA与蛋白质的相互作用

4.3. RNA作图和端点分析

4.4. RNA干扰技术

4.5. 分子杂交技术

4.6. 基因芯片技术

第5章 PCR技术及其应用

本章重点和难点：PCR技术的基本原理及其在基因工程操作中的使用策略。

5.1. PCR技术的基本原理和工作方式

5.2. 常规PCR技术

5.3. 未知DNA片段的扩增

5.4. 反转录PCR技术

5.5. 实时荧光定量PCR

第6章 DNA测序技术

本章重点和难点：各种DNA测序技术的基本原理及特征，在现代基因工程研究中各种测序技术的优缺点及具体应用。

6.1. 第一代DNA测序技术

6.2. 第二代测序技术

6.3. 单分子测序技术

6.4. 单细胞测序技术

6.5. 转录组测序技术

第7章 基因组研究技术

本章重点和难点：现代基因组研究技术的常用手段及其原理。

7.1. 传统基因组研究技术

7.2. 3D基因组技术

7.3. 功能基因组研究技术

7.4. 基因组工程技术（基因编辑技术）

第8章 DNA诱变

本章重点和难点：各种DNA诱变的原理和方法，其在现代基因工程育种技术中的具体操作方式与策略。

8.1. 随机诱变

8.2. DNA体外重组

8.3. 寡核苷酸介导的定点诱变

8.4. 嵌套缺失

第9章 DNA文库的构建及目标基因的筛选

本章重点和难点：基因组DNA文库与cDNA文库构建的原理及其步骤。在基因工程操作中基因文库的使用条件及应用方式。

9.1. 基因组DNA文库的构建

9.2. cDNA文库的构建

9.3. 基因文库克隆子的筛选策略

第10章 植物基因工程

本章重点和难点：植物基因工程的技术手段和应用。

10.1. 植物基因工程的发展与现状

10.2. 植物基因工程基本方法和策略

10.3. 植物基因工程的应用的展望

第11章 动物基因工程

本章重点和难点：动物基因工程的技术手段和应用。

11.1. 动物基因工程的发展现状和趋势

11.2. 动物转基因技术方法和策略

11.3. 转基因动物的应用与安全评价

第12章 酵母基因工程

本章重点和难点：酵母表达系统及其在基因工程中的应用。

12.1. 酵母基因工程的发现现状和趋势

12.2. 酵母表达系统

12.3. 酵母基因工程的应用

第13章 细菌基因工程

本章重点和难点：细菌表达系统及其在基因工程中的应用。

13.1. 细菌基因工程的发展现状和趋势

13.2. 细菌表达系统

13.3. 细菌基因工程的应用

第14章 病毒基因工程

本章重点和难点：各种病毒载体及其在基因工程中的应用。

14.1. 病毒载体

14.2. 病毒基因工程的应用

第15章 医药基因工程

本章重点和难点：基因工程药物的种类及其开发流程。

15.1. 基因工程药物开发现状和发展趋势

15.2. 基因工程药物及其开发策略

第16章 基因工程的安全性

本章重点和难点：基因工程的安全性评价及其保障措施。

16.1. 基因工程产品的安全性评价

16.2. 基因工程技术的安全性管理

五、参考书目

1. 孙明. 基因工程（第二版）[M]. 北京：高等教育出版社，2006.

2. Primrose S B, Twyman R. Principles of gene manipulation and genomics[M]. John Wiley & Sons, 2013.

3. Green M R, Sambrook J. Molecular Cloning, a laboratory manual, 4th edition. Cold Spring harbor, New York，2012

4. Below F E A L. Molecular cloning a laboratory manual, fourth edition[J]. 2015

5. 常重杰. 基因工程（第一版）[M]. 科学出版社，2012.